生化需氧量检测是指微生物在有氧条件下分解水中某些可氧化物质，特别是有机物所进行的生化过程所消耗的溶解氧量。这个生化过程需要很长时间，在20°C培养，需要100天才能完成这个过程。目前国内外均采用20±1℃培养5天作为检测指标来测定水质样品培养前后溶解氧的差异。
今天我们的主要目的是让大家了解生化需氧量（BOD）的检测方法和意义，并掌握此类方法的操作技巧。
1、恒温培养箱
2、 5-20l薄口玻璃瓶
3、1000-2000ml量筒
4、玻璃搅拌棒：搅拌棒长度应比量筒高度长200mm。在杆的底部固定有一块直径小于量筒底部并带有若干小孔的硬橡胶板。
5、溶解氧瓶：250-300ml之间，带磨砂玻璃塞，钟形口密封供水。
6、虹吸管用于取水和加入稀释水。
1、将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO3）、21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g七水磷酸氢二钠（N2HPO4·7H2O）和1.7g氯化铵（NHC）溶解在此水中并稀释pH值1000ml的溶液应该是7
2、硫酸镁溶液
将 225g 七水硫酸镁 （MgSO·7H2O） 溶于水中并稀释至 1000ml。
3、氯化钙溶液
将 27.5g 无水氯化钙溶于水中并稀释至 1000ml。
4、氯化铁溶液
将 0.25g 六水氯化铁 （FeCl3·6H2O） 溶于水中并稀释至 1000ml。
5、盐酸溶液（0.5mol/L）
将 40ml 盐酸（=1.18g/m2）溶于水中并稀释至 1000ml。
6、氢氧化钠溶液（0.5mol/L）
将 20g 氢氧化钠溶于水中并稀释至 1000ml。
7、亚硫酸钠溶液（1/2Na2SO2=0.025mol/L）
将 1.575g 亚硫酸钠溶于水中并稀释至 1000ml。此解决方案不稳定，需要每天准备。
8、葡萄糖-谷氨酸标准溶液
葡萄糖（CH2O）和谷氨酸（HOOC--CH2CH2CHNH2-OOH）在103℃干燥1小时后，称取各150mg溶于水中，移入1000ml容量瓶中，稀释至刻度，混匀。使用前准备。
9、稀释水
将一定量的水放入5-20L的玻璃瓶中，控制水温在20°C左右。然后用无油空压机或隔膜泵将吸入的空气通过活性炭吸附管和水洗管，然后引入稀释水中曝气2-8小时，使溶解氧在稀释水接近饱和。停止曝气时也可通入适量的纯氧。瓶盖由两层经清洗和干燥的纱布制成，置于20°C的恒温箱中数小时，使水中的溶解氧含量达到8mg/L左右。临用前，每升水中加入1ml氯化钙溶液、氯化铁溶液、硫酸镁溶液和磷酸盐缓冲溶液，混合均匀。
稀释水的pH值应为7.2，BOD应小于0.2mng/L
10、接种液
您可以选择以下任何一种方法来获得合适的接种物。
①城市污水，一般是生活污水，常温放置一昼夜，取上清液备用。
②表层土壤提取液，取花园或植物生长土100g，加水1L，混匀静置10min，取上清液备用
③使用含有城市污水的河水或湖水
④污水处理厂出水
⑤分析难降解物质废水时，取其排污口下游3~8km处的水样作为废水驯化接种物。如果没有这样的水源，可以用中和或适当稀释的废水进行连续曝气，每天加入少量此类废水，并加入适量的地表土壤或生活污水，使微生物能够繁殖。可以适应这种废水的繁殖。当水中出现大量絮凝物，或检测到化学需氧量的下降突然发生变化时，表明适用微生物已经繁殖，可以用作接种物。一般驯化过程需要3-8d。
11、接种二稀释水
取适量接种液，加入稀释水中，混匀。每升稀释水加入的接种量为：生活污水1～10ml；或20~30ml表土提取物；或10~100ml的河水和湖水。
接种稀释水的pH值应为7.2，BOD值应在0.3～1.0mg/L之间。接种稀释水配制后应立即使用。
（1） 溶解氧含量高、有机物含量低的地表水可不经稀释直接虹吸，将20℃左右的混合水样转移到两个溶解氧瓶中。注意转移过程不要产生气泡。用同样的操作使两个溶解氧瓶装满水样并加塞后稍微溢出。瓶内不应有气泡。
（2）立即测量其中一个瓶子的溶解氧，另一个瓶子的口用水密封，然后放入培养箱中，在20+1°C下培养5天。栽培过程中注意加入密封水。从放入培养箱开始算，五天五夜后，弃掉封水，测定剩余溶解氧。
（1）稀释倍数的确定：根据实践经验，提出如下计算方法，供稀释时参考。
①地表水：由测得的高锰酸盐指数与一定系数的乘积计算稀释系数。
②工业废水：用重铬酸钾法测定的COD值确定。通常需要三个稀释比。使用稀释水时，将COD值乘以系数0.075、0.15、0.225，即可得到三个稀释倍数。使用接种稀释水时，分别乘以0.075、0.15、0.25三个系数。
注：COD 测定时，在加热回流60 分钟时，按照与COD 测定相同的程序，用邻苯二甲酸氢钾溶液校准试验制备的标准色柱估算COD 值。
最后通过计算得到未经稀释的水样的生化需氧量，此时培养水样的生化需氧量已被稀释。
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